随着生物医学技术的发展,即用型免疫组化试剂盒因其诸多优势而备受关注。这些试剂盒的操作步骤简洁明了,快速方便,让实验室人员能够高效完成免疫组化实验。用户只需从尊龙凯时人生就博购买一抗及该试剂盒,即可开始实验。
尊龙凯时人生就博提供的SP(Streptavidin-Peroxidase)即用型免疫组化检测试剂盒采用了目前先进的LAB-SA第二代技术,具有优越的高灵敏度和低倍景染色特点。该试剂盒的操作过程也非常便利,用户只需直接滴加所需试剂,缩短了孵育时间,适用于冷冻切片、石蜡切片和固定细胞涂片,特别适合检测兔来源的一抗。
在使用该试剂盒时,用户将获得以下基本材料:无色试剂(内源性过氧化物酶阻断剂)、封闭用的正常山羊血清工作液(试剂A)、生物素标记的二抗工作液(试剂B)以及辣根酶标记链酶卵白素工作液(试剂C)。
需要特别提示的是:该系列检测试剂盒适合绝大多数组织,但对于内源性生物素含量比较丰富的组织(如肾脏、肝脏等),建议选择非生物素检测系统或采用avidin进行封闭。同时,每张切片如添加1滴(约50μl)工作液,3ml的试剂可用于60张切片,而6ml则可用于120张切片。
免疫组化实验的染色步骤如下:
1. 石蜡切片处理:常规脱蜡至水。
2. 用蒸馏水冲洗,随后用PBS浸泡5分钟(如需抗原修复,可在此步骤后进行)。
3. 用3%双氧水孵育去离子水(无色液体)15-20分钟,以消除内源性过氧化物酶活性。
4. 滴加试剂A(蓝色液体),室温孵育15-20分钟后倾去,切勿清洗。
5. 滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3小时或于4℃过夜。
6. 用PBS洗涤,3分钟洗3次。
7. 滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20分钟。
8. 用PBS洗涤,3分钟洗3次。
9. 滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20分钟。
10. 用PBS洗涤,3分钟洗3次。
11. 进行显色(使用DAB或AEC显色剂)。
12. 用自来水充分冲洗。
13. 如需复染,进行脱水和透明处理。
14. 选择合适的封片剂进行封片。
通过尊龙凯时人生就博的即用型免疫组化试剂盒,科研人员能够更加高效、便捷地完成实验,享受生物医学研究的乐趣与成就。