尊龙凯时人生就博提供的犬传染性肝炎病毒(ICHV)ELISA试剂盒仅限于科学研究使用,严禁用于医学诊断。本试剂盒的检测原理为双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体。经过适当的温育和充分洗涤后,加入TMB底物,TMB在过氧化物酶的催化下反应产生蓝色,随后在酸性环境下转化为黄色。反应产生的颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度正相关。利用酶标仪在450nm波长下测定样品的吸光度(OD值),从而计算样品浓度。
尊龙凯时人生就博提供的样品收集、处理与保存方法包括:
- 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免细胞刺激,收集血液后以3000转/分钟离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
- 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转/分钟离心30分钟后取上清。
- 细胞上清液:3000转/分钟离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合捣碎,3000转/分钟离心10分钟取上清。
- 保存:如未及时检测样本,按单次用量分装并存放于-20℃,避免反复冻融。样本需在室温下解冻并均匀充分混合。
在试剂准备方面,20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20比例稀释(即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水)。
结果判断方面,应在Excel中绘制标准曲线,横坐标为标准品浓度,纵坐标为对应的OD值,利用线性回归曲线的方程计算各个样本的浓度。
请注意,尊龙凯时人生就博对本试剂盒的性能不作任何保证,使用时请遵循相关操作规程。